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本生知識點—ELISA樣本分析及實驗原理

更新時間:2023-03-20    點擊次數:575

  本生知識點—ELISA樣本分析及實驗原理


  elisa試劑盒實驗原理:

  試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中產品水平。用純化的其抗體包被微孔板,制成固相抗體。往包被單抗的微孔中依次加入本產品,再與HRP標記的其抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中產品的濃度。

  elisa試劑盒種屬:人,大鼠,小鼠,雞,鴨,魚,貓,馬,豬,兔,倉鼠,豚鼠,裸鼠,植物等elisa試劑盒。

  ELISA樣本分析:

  1.回溫平衡:

  在加樣之前約半小時左右,把試劑盒從冰箱中取出,放置在室溫下進行平衡,平衡到用手握住試劑瓶感覺到不涼為止。如果時間匆忙的話也可以利用手握住試劑瓶進行快速回溫。

  2.反應時間:

  盡量把時間控制在需要的反應時間,如果時間比較緊迫的話也可以把時間稍微延長幾分鐘,但不宜太長。顯色時間可根據顏色深淺進行調整。

  3.加樣:

  取出相應數量的微孔板放置在板架上,然后再對板孔進行編號,再對需要稀釋的抗體或酶標記物進行稀釋。在板孔的前六個孔內分別加入標準品1-6,然后在剩下的板孔內加入樣品分析液。然后再在每孔內加入其余需要加入的液體。蓋上蓋板膜以后小幅度振蕩,然后放置在相應的環(huán)境中進行反應。如是25℃環(huán)境反應,則可放置在空調房內進行反應;如果是37℃環(huán)境下反應,則必須放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱里進行反應,如果是4℃環(huán)境下反應,則必須放置在2-8度冰箱里進行培養(yǎng)。

  4.洗板:

  把板內液體甩干,加入稀釋好的洗液250ul/孔,靜置10s或稍作振蕩后甩掉孔內液體,再次加入洗液,以此重復3-4遍,洗完以后利用吸水紙把孔內液體充分拍干后進行下一步操作,如果孔內有氣泡,則利用干凈的槍頭刺破。

  5 結束實驗:

  把加樣槍全部調到zui大量程,試劑盒放入冰箱,試管及離心管進行清洗,關閉不用的儀器.

  ELISA試劑盒 本生一直視質量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。


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